研究报告
水稻 OsUAP2 基因生物信息学分析及原核表达活性鉴定 
肖桂青1* 
,
陈雅婷1 
,
周嘉豪2 ,
文媛1 ,
高敏1 ,
张海文2 ,
卢向阳1*
,
陈雅婷1 ,
周嘉豪2 ,
文媛1 ,
高敏1 ,
张海文2 ,
卢向阳1*
1湖南农业大学生物科学技术学院,长沙, 410128; 2中国农业科学院生物技术研究所,北京, 100081
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 1 篇
收稿日期: 2020年07月18日 接受日期: 2020年07月24日 发表日期: 2022年07月18日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 1 篇
收稿日期: 2020年07月18日 接受日期: 2020年07月24日 发表日期: 2022年07月18日
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摘要
UAGPase 广泛存在于生物体，是糖代谢过程中一类重要酶。我们前期发现水稻 OsUAP1 具有单向催化 UDPG 分解代谢活性，OsUAP2 与 OsUAP1 序列相似性极高。本研究对 OsUAP2 进行生物信息学分析，构建并表达重组蛋白，并鉴定其酶蛋白活性。结果表明，OsUAP2 基因位于 4 号染色体，编码区序列长 1 482 bp，编码 493 个氨基酸；OsUAP2 具有 UDPGP 保守结构域，无跨膜区域，N- 端不含信号肽；二级结构分析显示，该蛋白含 α- 螺旋和无规则卷曲较多；同源性分析表明，OsUAP2 与玉米 UAGPase 的亲缘关系最近。在 16 ℃下经 0.1 mmol/L IPTG 诱导 8 h，原核菌株 BL21 表达出分子量约 55 kD 可溶性重组蛋白。体外酶活性测定表明，OsUAP2 能同时催化 UDPG 降解和合成，表现出双向可逆催化的特点。本研究结果为进一步深入研究 OsUAP2 基因的生物学功能提供了科学依据。
关键词
水稻；OsUAP2；原核表达蛋白；酶活测定
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